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轉基因植物Bar基因核酸試劑盒廠家

產品簡介

轉基因植物Bar基因核酸試劑盒廠家
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更新時間:2021-03-13
訪問次數:1046
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產品名稱

 轉基因植物Bar基因核酸試劑盒廠家

 規格

 48T

 貨號

 LZP8174

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
[Tyr34]-甲狀旁腺激素(7-34) 酰 (牛)酰酸叔丁酯

[Trp4]-Kemptide(S)-1-N-Boc-2-甲基哌

[Tyr8]緩激肽BOC-N-甲基-L-氨酸

[Tyr9]- β-促黑激素 (豬)氫化鋰

α-心鈉素(1-28), human鄰磺酰

α-促黑激素硫代草氨酸酯

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β-淀粉樣蛋白(25-35)3,6-二吡啶羧酸

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β-促黑激素,猴氟-

Ac-垂體腺苷酸環化酶激活肽-38,人,小鼠,綿羊,豬,大鼠2,5-二

Ac-YVAD-肽核酸特戊?;狨?/span>

促腎上腺皮質激素(1-10),人間甲酰

促腎上腺皮質激素(1-13),人間氟甲酰

促腎上腺皮質激素(1-16),人氧基-1,1,1-三氟--2-酮

促腎上腺皮質激素(1-17),人N-芐基甘氨酸

促腎上腺皮質激素(1-24), 人對環己酮甲酸酯

促腎上腺皮質激素(1-39),人氫氧化鋇

β-抑制蛋白2/β休止蛋白2/β-arrestinPhospho-FoxO3a (Ser294) /FITC  熒光素標記兔抗、大、叉頭蛋白3AIgG100 ul

炭疽桿菌Phospho-FoxO3a (Ser253) /FITC  熒光素標記兔抗、大、叉頭蛋白3AIgG100 ul

腎上腺皮質發育異常蛋白FOXO4/FITC  熒光素標記兔抗、大、叉頭蛋白4IgG100 ul

血管緊張素Ⅱ1A型受體Phospho-FoxO4 (Ser193) /FITC  熒光素標記兔抗、大、叉頭蛋白4IgG100 ul

ABI1/SSH3BP1蛋白phospho-FOXO4 (phospho S197) /FITC  熒光素標記兔抗、大、叉頭蛋白4IgG100 ul

?;M蛋白H1bphospho-FOXO4 (Ser262) /FITC  熒光素標記兔抗、大、叉頭蛋白4IgG500 ul

酸化雄激素受體FOXF1/FITC  熒光素標記叉頭蛋白F1IgG100 ul

多功能DNA修復酶FOXM1/HFH 11/FITC  熒光素標記插頭蛋白M1IgG20 ul

AP2關聯激酶1FoxP1/FITC  熒光素標記FoxP1(T細胞轉錄因子)IgG100 ul
轉基因植物Bar基因核酸試劑盒廠家磷酸化轉錄因子ERF抗體N6-Benzoyl-5'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)-2'-deoxyadesine中文名:N6-苯甲?;?5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-2'-脫氧腺苷別名:分子式:C38H35N5O6

真核肽鏈釋放因子1抗體N4-Benzoylcytidine中文名:N4-苯甲酰胞苷別名:分子式:C16H17N3O6

真核肽鏈釋放因子3a抗體9-Benzoylcarbazole中文名:9-苯甲?;沁騽e名:分子式:C19H13

表皮生長因子受體底物15抗體3-Benzoylthiazolidine-2-thione中文名:3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮別名:分子式:C10H9S2

內吞作用輔助蛋白EPN1抗體Betamethasone中文名:倍他米松別名:分子式:C22H29FO5

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