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一步法RT-PCR試劑盒

產品簡介

啶1-氧基自由基(>97.0%(GC)(T))α-E-Canin AntibodyBOC-胍

(2-酰氨基)-2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧基自由基(>96.0%(HPLC))Profilin-1 Antibody3,5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酸酯

雞5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒PNK1/PNKP 多聚合苷酸激酶3酸

更新時間:2021-03-15
訪問次數:805
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產品名稱

 一步法RT-PCR試劑盒

 規格

 50T

 貨號

 LZP7884

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
吉拉德試劑 P(>95.0%(T))MCM4 Antibody2,2-二氟-2-溴酰

2-肼基吡啶(>98.0%(GC)(T))Jak2 (D2E12) XP® Rabbit mAb2-氨基-氟吡啶

2-肼鹽酸鹽(>98.0%(T))Jak2 (D2E12) XP® Rabbit mAb2-溴-5-甲酸

-1,2,三唑啉-3,5-二酮(含氮量:23.50-24.30 %)Jak2 (D2E12) XP® Rabbit mAb1-甲基胍鹽酸鹽

[3,5-二甲基-(硝基芐氧基)基]-氧代丁酸琥珀酰亞酯(>96.0%(HPLC))Phospho-Gab1 (Tyr627) Antibody基-1,磺酸內酯

異酸對甲磺酰酯(>95.0%(T))Gab1 Antibody硝地平

N-叔丁基-α-基硝酮(>98.0%(HPLC)(T))Gab1 Antibody2-氟-5-甲?;?/span>

N-叔丁基-α-(吡啶基-1-氧)硝酮(>98.0%(HPLC)(T))Phospho-Gab1 (Tyr627) (C32H2) Rabbit mAb氟-

5,5-二甲基-1-吡咯啉 N-氧化物(>97.0%(GC)(T))Phospho-Gab1 (Tyr627) (C32H2) Rabbit mAb5-芐硫基四氮唑

5-(二氧基酰)-5-甲基-1-吡咯啉 N-氧化物(>98.0%(N))Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit2-羥基-硝基-甲基吡啶

(>98.0%(GC))SPHK2 (D2V3G) Rabbit mAb2-氨基-甲基-5-硝基吡啶

2,4,6-三叔丁基亞(>98.0%(GC))Phospho-Gab1 (Tyr307) Antibody2-溴基酮

3,3,5,5-四甲基-1-吡咯啉 N-氧化物(>98.0%(GC))Phospho-Gab1 (Tyr307) Antibody鹽酸羥

氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧自由基(>97.0%(GC))SKAR Antibody[-(三氟甲基)基]-哌啶

酰氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧基自由基(>98.0%(GC))TFEB (D4L2P) Rabbit mAb3,4,5-三溴

羧基-2,2,5,5-四甲基吡咯烷-1-氧基自由基(>98.0%(HPLC)(T))α-E-Canin Antibody3,5-二溴-2-羥基吡

羧基-2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧基自由基(>97.0%(GC)(T))α-E-Canin AntibodyBOC-胍

(2-酰氨基)-2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧基自由基(>96.0%(HPLC))Profilin-1 Antibody3,5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酸酯

5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒PNK1/PNKP  多聚合苷酸激酶3酸化酶100 ul

Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118)  酸化多聚合苷酸激酶3酸化酶20 ul

Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒Podoplanin/gp36  平足蛋白100 ul

17-酮類固(17-KS)ELISA試劑盒Pokemon  蒙蛋白100 ul

17羥皮質類固(17-OHCS)ELISA試劑盒Polycystin 1  多囊腎蛋白1100 ul

13,14二氫15-酮F2α(PGFM)ELISA試劑盒Polycystin 2  多囊腎蛋白2100 ul

ELISA試劑盒PP-1B  蛋白酸酯酶-1B100 ul

可溶性白介素-2 受體(sIL-2R)ELISA試劑盒PP2A alpha  蛋白質酸酶-2A100 ul

可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA試劑盒PP2A alpha  蛋白質酸酶-2A20 ul
一步法RT-PCR試劑盒人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒英文名稱:Human Leukotriene C4,LT-C4 ELISA Kit進口/原裝

人白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒英文名稱:Human leukotriene D4,LT-D4 ELISA Kit*

人白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒 英文名稱:Human leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit *

人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒英文名稱:Human Candida Albicans,C.albicans ELISA Kit*

人白細胞彈性蛋白酶(HLE)ELISA試劑盒 英文名稱:Human leukocyte exastase,HLE ELISA Kit*

人白細胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒英文名稱:Human leukocyte common antigen,LCA/CD45 ELISA Kit*小鼠中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒      組裝/原裝

小鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒      組裝/原裝

小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒      組裝/原裝

小鼠脂聯素(ADP)ELISA試劑盒      組裝/原裝         

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