小鼠ELISA試劑盒一般保存在2-8℃環境下,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F象,水浴加熱使結晶全溶解后再使用。實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。預處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。液體組分使用前充分搖勻。
小鼠ELISA試劑盒的樣本取血操作(以小鼠為例):
1.剪尾采血
小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml。左手拇指和食指從背部抓住鼠頸部皮膚,將鼠頭朝下,鼠保定后將其尾巴置于50℃熱水中浸泡數分鐘,使尾部血管充盈。擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm,用試管接流出的血液,同時自尾根部向尾尖按壓。取血后用棉球壓迫止血并用6%液體火棉膠涂在傷口處止血。
2.摘除眼球采血
小鼠采血量0.5-1ml,左手抓住小鼠頸部皮膚,輕壓在實驗臺上,取側臥位,左手食指盡量將小鼠眼周皮膚往頸后壓,使眼球突出。用眼科彎鑷迅速夾去眼球,將鼠倒立,用器皿接住流出的血液。采血完畢立即用紗布壓迫止血。大鼠少用。
3.心臟采血
小鼠采血量0.5-0.6ml,大鼠采血量1-1.5ml鼠仰臥位固定,剪去胸前區被毛,皮膚消毒后,用左手食指在左側第3-4肋間觸摸到心搏處,右手持帶有4-5號針頭的注射器,選擇心搏強處穿刺,當刺中心臟時,血液會自動進入注射器。
4.斷頭采血
小鼠采血0.8-1.2ml,大鼠采血量5-10ml左手拇指和食指從背部抓住鼠頸部皮膚,將鼠頭朝下,右手用剪刀剪斷鼠頸部約1/2-4/5,讓血液流入試管。
5.眼眶靜脈叢采血
小鼠采血量為0.2-0.4ml,大鼠采血量為0.4-0.8ml。取內徑為1.0-1.5mm的玻璃毛細管,臨用前折斷成1-1.5cm長的毛細管段,浸入1%肝素溶液中,干燥后用。取血時左手抓住鼠兩耳之間的頸背部皮膚以固定頭部,輕輕向下壓迫頸部兩側,引起頭部靜脈血液回流困難使眼眶靜脈叢充血,右手持毛細管由內眥部插入結膜,再輕輕向眼底部方向推進,輕輕旋轉毛細管以劃破靜脈叢,讓血液順毛細管流出,接收入事先準備的容器中。采血后紗布輕壓眼部止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采取此法取血。刺入深度小鼠為2-3mm,可采血0.2-0.3ml;大鼠為4-5mm,可采血0.4-0.8ml。