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小鼠ELISA試劑盒的競爭法實驗步驟分析

更新時間: 2023-01-09  點擊次數: 333次
  小鼠ELISA試劑盒定量測定人血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中相關物質含量。常用方法包括雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。今天我們來聊聊競爭法,競爭法測抗體有多種模式,可將標本和酶標抗體與固相抗原競爭結合,抗HBc ELISA一般采用此法。另一種模式為將標本與抗原一起加入到固相抗體中進行競爭結合,洗滌后再加入酶標抗體,與結合在固相上的抗原反應,抗HBe的檢測一般采用此法。
 
  小鼠ELISA試劑盒的競爭法實驗步驟如下所述:
 
  1.以稀釋液將待檢標本做適當稀釋(預試中確定)加入包被有已知抗原的酶標板中(50ul/孔),加封口膠帶于37℃作用30min;
 
  2.棄反應液,以沖洗液連續洗板5次并于吸水紙上拍干;
 
  3.加入酶標抗體(濃度在預試中確定)。加封口膠帶后于37℃作用30min;
 
  4.重復第2步;
 
  5.加底物(濃度在預試中確定),小鼠ELISA試劑盒加封口膠帶后于室溫下避光作用5-60 min,其間不時觀察,顯色滿意后加終止液50ul/孔;
 
  6.在酶標儀中測定OD值,OPD用492nm測定,TMB用450nm測定。

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