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熒光-PCR法相比普通PCR模式的優勢

更新時間:2023-01-05點擊次數:526
   近年來,熒光-PCR法技術有了重大改進。將傳統PCR檢測模式中的PCR擴增和檢測相結合(即在同一個密閉容器中將PCR擴增反應與熒光標記探針檢測結合在一起)檢測目的核酸的檢驗方法紛紛出臺。這樣的檢測方法稱為“實時”PCR,表示PCR擴增產物可被實時檢測。準確地說,“實時”是指在每一個PCR循環后檢測擴增產物,當PCR擴增反應結束后,我們可得到每個樣品的PCR擴增產物變化曲線。通過分析這些反應曲線,不但可得到病原體的定性檢測結果,還可對病原體的數量進行精確定量。
  實時熒光-PCR法不僅具有普通PCR的高靈敏性,而且由于應用了熒光探針,可通過光電傳導系統直接探測PCR擴增過程中熒光信號的變化以獲得定量結果,所以還具有DNA雜交的高特異性和光譜技術的高準確性,克服了常規PCR的許多缺點。
  熒光-PCR法相比較普通PCR模式的優勢:
  1.由于實時熒光PCR采用封閉的檢測模式,因此擴增產物導致污染的可能性比普通PCR要小得多。
  2.由于擴增產物的檢測在PCR擴增過程中同時進行,并且數據的采集、分析全部由儀器自動完成,因此整個檢測所需的時間比普通PCR要節省許多。
  3.實時熒光PCR檢測模式功能強大,具備定性、定量、突變、多項目等檢測功能。而普通PCR要完成上述項目需采用不同的技術平臺。
  4.實時熒光PCR進行定量檢測時,其定量線性范圍(5-6 logs)比普通PCR(2-3 logs)要寬得多。

TEL:021-61210612

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